1)分层手术室的墙壁和天花板采用隔音、实心、光滑、无间隙、防火、防潮和易于清洗的方法。颜色为浅蓝色和浅绿色。手表灯、药柜、手术台等应位于墙面。墙面与平顶、墙壁与地面的负(正)角以及不同墙壁与墙壁的交汇处应制成一个小圆角结构(R≤50 mm)，以避免积尘，便于清洗。
(2)门应宽且无门限，净宽不应小于1.4m，平车进入方便，应避免摆动弹簧门，以防止气流使灰尘和细菌飞溅。层流手术室应使用带有自动延迟关闭装置的电动悬挂自动感应门。窗户应双层，带有铝合金窗框，有利于防尘和保温。
(3)层流手术室净高度2.8~3m，走廊宽度不小于2.5m，便于平车操作，避免人员碰撞。
(4)分层手术室应采用硬质、光滑、刷刷材料建造，地面略倾斜至地面下角，有利于污水排放和排水孔盖，以免污染室内空气或被异物堵塞，应光滑、光滑、耐磨、耐腐蚀(酸、碱、药)、易清洗、橡胶、聚氨酯涂料、树脂板等，接缝少，可避免污垢和细菌的积聚，耐污染和清洁，图案多样，安装更换简单。
(5)供电：应设有两相供电设施，操作。每间手术室应有足够的插座，方便各种仪器设备的供电。插座应有防火花卉装置，手术室内应有导电设备，防止火花爆炸。插座应密封，防止进水，避免线路故障影响操作。主电源线集中在壁上，中央、氧气管道装置安装在墙上。
(6)照明设施：普通照明应安装在墙壁或屋顶上。外科手术灯不应安装影子灯，并应保留起重灯。
(7)层流手术室的水源和防火设施：每个工作间应安装水龙头，方便清洗，走廊和辅助室应安装灭火器，热水、冷水和高压蒸汽应足够。
(8)通风过滤消毒装置：现代层流手术室应建立完善的通风过滤消毒装置，对空气进行净化，其通风方式为紊流、层流、垂直型，可酌情选择。
(九)层流手术室的进出路线布局：通道的布局设计应符合功能流和污染区划的要求，并应设置三条进出通道，一条为工作人员，另一条为病残人员，第三条为流通补给路线，如设备敷料，以尽可能避免交叉感染。
